技術(shù)概述：高通量快速檢測技術(shù)是指一次可快速檢測多個樣品或?qū)ν粯悠愤M(jìn)行多種檢測的技術(shù)。微生物的常規(guī)檢測方法是培養(yǎng)法，基本過程是首先培養(yǎng)和分離微生物，然后再進(jìn)行生化鑒定，有時還需要進(jìn)行血清學(xué)鑒別，整個過程通常需要3~7天時間，甚至更長的時間，其檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，但費(fèi)時費(fèi)力。金黃色葡萄球菌紙片法將傳統(tǒng)方法中需要多次實(shí)驗(yàn)才能完成的任務(wù)一次完成，并在15小時~24小時內(nèi)獲得結(jié)果，從而大大節(jié)約樣品分析時間。

增產(chǎn)增效情況：農(nóng)產(chǎn)品、食品快速檢測技術(shù)，作為其質(zhì)量監(jiān)管的重要手段，對及時開展監(jiān)測、了解我區(qū)酥油、糌粑、糕點(diǎn)、生熟食品等微生物污染狀況具有重要意義。通過監(jiān)管手段的更新，為監(jiān)督和食品衛(wèi)生提供技術(shù)支撐，有效促進(jìn)食源性疾病的及時發(fā)現(xiàn)和防控，將產(chǎn)生巨大社會經(jīng)濟(jì)效益。

技術(shù)要點(diǎn)：

1、操作方法

（1）樣品處理：取樣品25毫升（克）放入含有225毫升磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，調(diào)節(jié)樣品勻液pH至6.0~8.0。用1毫升吸管吸取1:10樣品勻液1毫升，注入含有9毫升稀釋液的試管內(nèi)，振搖后成為1:100的樣品勻液，以此類推，每次換一支吸管。

（2）接種：一般食品選2~3個稀釋度進(jìn)行檢測，將金黃色葡萄球菌測試片（BT206）置于平坦實(shí)驗(yàn)臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1毫升樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10秒左右，使培養(yǎng)基凝固，每個稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對照。

（3）培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15 小時~24小時。

2、結(jié)果判讀：培養(yǎng)后，測試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌；呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證，沒有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。

3、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式

（1）選擇菌落數(shù)在20~200個之間的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（2）若兩個稀釋度的菌落數(shù)均在20~200之間，則取其平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，即為每毫升（或每克）樣品中金黃色葡萄球菌數(shù)。

（3）如果所有稀釋度的測試片上的菌落數(shù)都小于20，則計(jì)數(shù)稀釋度的測試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之；如果所有稀釋度的測試片上均無菌落生長，則以小于1乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。

（4）如果所有稀釋度的菌落數(shù)都大于200，計(jì)數(shù)稀釋度的測試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。計(jì)數(shù)菌落數(shù)大于200的測試片時，也可計(jì)數(shù)一個或兩個具有代表性的方格內(nèi)的菌落數(shù)，換算成單個方格內(nèi)的菌落數(shù)后乘以20（濾紙區(qū)面積為20平方厘米），即為測試片上估算的菌落數(shù)。報(bào)告單位以CFU/毫升（或CFU/克）表示。

適宜區(qū)域：適宜全區(qū)各地。

技術(shù)依托單位：西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測研究所

通訊地址：西藏拉薩市金株西路149號區(qū)農(nóng)科院質(zhì)標(biāo)所（綜合實(shí)驗(yàn)樓）